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    Ec UDG酶

    簡(jiǎn)(jiǎn)要描述:Ec UDG酶可催化水解含有尿mi啶的 DNA 鏈的尿mi啶堿基和糖磷酸骨架的 N-糖苷鍵,釋放游離尿mi啶。本尿mi啶 DNA 糖基酶(UDG)來(lái)(lái)源于大腸桿菌 ung 基因,經(jīng)(jīng)重組表達與多步蛋白純化而得。該酶分子量為 25KDa,催化含尿mi啶的單鏈和雙鏈 DNA 釋放游離尿mi啶,對 RNA 無(wú)(wú)活性。

    • 產(chǎn)(chǎn)品型號:
    • 廠(chǎng)(chǎng)商性質(zhì)(zhì):經(jīng)(jīng)銷(xiāo)(xiāo)商
    • 更新時(shí)(shí)間:2023-11-30
    • 訪(fǎng)(fǎng)  問(wèn)(wèn)  量:1733

    詳細介紹

    品牌BIOHUB供貨周期兩周
    應用領(lǐng)(lǐng)域生物產(chǎn)(chǎn)業(yè)(yè)
    Ec UDG酶產(chǎn)(chǎn)品描述

    UDG 酶可催化水解含有尿mi啶的 DNA 鏈的尿mi啶堿基和糖磷酸骨架的 N-糖苷鍵,釋放游離尿mi啶。本尿mi啶 DNA 糖基酶(UDG)來(lái)(lái)源于大腸桿菌 ung 基因,經(jīng)(jīng)重組表達與多步蛋白純化而得。該酶分子量為 25KDa,催化含尿mi啶的單鏈和雙鏈 DNA 釋放游離尿mi啶,對 RNA 無(wú)(wú)活性。

    UDG 酶常用于止 防止 PCR 擴增產(chǎn)(chǎn)物的交叉污染,其作用原理基于:在 PCR 反應中以 dUTP 替代dTTP 摻入 DNA 中,形成了含 dU 堿基的 PCR 擴增產(chǎn)(chǎn)物,UDG 能選擇性斷裂單鏈和雙鏈 DNA中 U 堿基的糖苷鍵,降解 PCR 擴增產(chǎn)(chǎn)物,消除上輪擴增產(chǎn)(chǎn)物對新樣本的污染問(wèn)(wèn)題。由于大腸桿菌 UDG 經(jīng)(jīng)高溫失活,降溫到低溫后,活性會(huì )(huì )部分恢復;因此不建議本酶用于 防止 PCR 擴增產(chǎn)(chǎn)物的交叉污染。建議利用本公司的熱敏 UDG(目錄號 AE0402)進(jìn)(jìn)行 防止 PCR 擴增產(chǎn)(chǎn)物的交叉污染。

    Ec UDG酶產(chǎn)(chǎn)品應用

    主要應用于 PCR 擴增產(chǎn)(chǎn)物的防污染。它的作用原理基于:在 PCR 反應中以 dUTP 替代 dTTP摻入 DNA 中,形成了含 dU 堿基的 PCR 擴增產(chǎn)(chǎn)物,UDG 能選擇性斷裂單鏈和雙鏈 DNA 中 U堿基的糖苷鍵,降解 PCR 擴增產(chǎn)(chǎn)物,消除上輪擴增產(chǎn)(chǎn)物對新樣本的污染問(wèn)(wèn)題。

    活性定義

    37℃反應條件下,每分鐘催化 60 pmole 尿mi啶堿基從含尿mi啶的雙鏈 DNA 上釋放所需要的酶量為 1 U。

    質(zhì)(zhì)量控制

    無(wú)(wú)內切酶活性:50 U 的本酶和 1 μg 的 pBR322 DNA 在 37℃下反應 2 小時(shí)(shí),DNA 的電泳譜帶不發(fā)(fā)生變化。

    運輸與保存

    干冰運輸。-20℃保存,有效期2年。

    注意事項

    為了您的安全和健康,請穿實(shí)(shí)驗服并戴一次性手套操作!

    本產(chǎn)(chǎn)品主要用于科研領(lǐng)(lǐng)域,不宜用于臨床診斷或其他用途。

    備注

    長(cháng)(cháng)期儲存 ( 非頻繁使用; 每月 1-2 次 ): -70℃;每天或每周使用: -20℃。盡量避免多次凍融,切勿暴露在溫度波動(dòng)(dòng)較大之處。溫度波動(dòng)(dòng)對產(chǎn)(chǎn)品的穩定性有極大影響。

    UDG 可以在 PCR 反應前清除不慎污染的 U-DNA 分子,對于某個(gè)(gè) PCR 擴增反應,整個(gè)(gè)實(shí)(shí)驗室必須在所有的 PCR 反應中添加 dUTP,使所有擴增產(chǎn)(chǎn)物都成為 U-DNA。如僅某次 PCR 擴增反應使用 dUTP,T -DNA 仍積累,這個(gè)(gè)抗污染系統也難以起到wan全的作用。

    UDG/dUTP 系統是 PCR 試劑專(zhuān)(zhuān)用的一種防污染措施,為了防止 PCR 產(chǎn)(chǎn)物的污染,尤其是在臨檢實(shí)(shí)驗室中反復擴增同一片段時(shí)(shí),必須嚴格規范實(shí)(shí)驗室的區域劃分和操作。

    如果經(jīng)(jīng)過(guò)(guò)換房間、紫外照射、DNase 消化等措施后,依然對某個(gè)(gè)片段存在污染,建議在不同的擴增區重新設計引物,以錯開(kāi)(kāi)污染片段。

    大腸桿菌 UDG 酶的反應溫度可以在 37℃-50℃ 的范圍內變化,建議在 37 度反應,也可根據實(shí)(shí)驗需要在 37-50 ℃范圍內自由調整反應溫度。

    為了您的安全和健康,請穿實(shí)(shí)驗服并戴一次性手套操作。

     

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