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    R-PE 藻紅蛋白

    簡(jiǎn)(jiǎn)要描述:R-PE 藻紅蛋白是從紅藻中分離純化的,能發(fā)(fā)出強烈的熒光,具有很好的吸光性能和很高的量子產(chǎn)(chǎn)率,在可見(jiàn)(jiàn)光譜區有很寬的激發(fā)(fā)及發(fā)(fā)射范圍。用常規的標記方法可以很方便地將其與生物su、親和素和各種單克隆抗體結合起來(lái)(lái)制成熒光探針,用于熒光顯微檢測、熒光免疫測定、雙色或多色熒光分析、癌細胞表面抗原檢測、流式細胞熒光測定等抗體熒光標記以及活體成像應用等診斷及生物工程技術(shù)(shù)。

    • 產(chǎn)(chǎn)品型號:78GD10007
    • 廠(chǎng)(chǎng)商性質(zhì)(zhì):經(jīng)(jīng)銷(xiāo)(xiāo)商
    • 更新時(shí)(shí)間:2023-11-30
    • 訪(fǎng)(fǎng)  問(wèn)(wèn)  量:1933

    詳細介紹

    品牌BIOHUB供貨周期兩周
    應用領(lǐng)(lǐng)域生物產(chǎn)(chǎn)業(yè)(yè)
    R-PE 藻紅蛋白產(chǎn)(chǎn)品描述
    藻紅蛋白是從紅藻中分離純化的,能發(fā)(fā)出強烈的熒光,具有很好的吸光性能和很高的量子產(chǎn)(chǎn)率,在可見(jiàn)(jiàn)光譜區有很寬的激發(fā)(fā)及發(fā)(fā)射范圍。用常規的標記方法可以很方便地將其與生物su、親和素和各種單克隆抗體結合起來(lái)(lái)制成熒光探針,用于熒光顯微檢測、熒光免疫測定、雙色或多色熒光分析、癌細胞表面抗原檢測、流式細胞熒光測定等抗體熒光標記以及活體成像應用等診斷及生物工程技術(shù)(shù)。
    R-PE 藻紅蛋白產(chǎn)(chǎn)品性質(zhì)(zhì)
    分子量:約 240,000 道爾頓
    組成:蛋白的亞基組成為(alpha-beta)6gamma。每個(gè)(gè)alpha-亞基和 beta-亞基約 20,000 道爾頓,每個(gè)(gè)
    gamma 亞基約 30,000 道爾頓。
    純度: Amax/A280 > 5.5
    激發(fā)(fā)波長(cháng)(cháng): :450-500 nm
    發(fā)(fā)射 波長(cháng)(cháng): :575 ± 5 nm
    形態(tài)(tài):硫酸銨沉淀
    產(chǎn)(chǎn)品特點(diǎn)(diǎn)
    1、該產(chǎn)(chǎn)品為硫酸銨沉淀,將其置換至20mM 磷酸鹽緩沖液中使用。
    2、在較寬的 pH 范圍內具有較寬的吸收光譜,比較容易選擇合適的激發(fā)(fā)波長(cháng)(cháng),從而得到高效熒光發(fā)(fā)射,
    且激發(fā)(fā)時(shí)(shí)有特異的熒光發(fā)(fā)射峰;
    3、吸光度和熒光量子產(chǎn)(chǎn)率很高,熒光強而穩定,靈敏度高;
    4、具有較小的熒光背景,不易淬滅,熒光保存期較長(cháng)(cháng);
    5、易與其他分子交聯(lián)(lián)結合,非特異性吸附少;
    6、chun天然海洋生物提取,無(wú)(wú)任何毒副作用,不含放射性,操作使用非常安全。易與抗體、生物su、
    親合素、 免疫蛋白等物質(zhì)(zhì)結合,制成熒光探針。
    使用方法
    使用方法
    抗體標記(僅供參考)
    試驗材料:
    藻紅蛋白:分子量約 240000 道爾頓;PD-10 柱(葡聚糖凝膠層析柱 Sephadex G-25M) ,安瑪西亞 Amersham公司產(chǎn)(chǎn)品,產(chǎn)(chǎn)品目錄號 No. 17-0851-01; NAP5 柱(葡聚糖凝膠層析柱 Sephadex G-25 DNA grade), 安瑪西亞Amersham 公司產(chǎn)(chǎn)品,產(chǎn)(chǎn)品目錄號 No 17-0853-02;琥珀酰亞胺-4-(N- 甲基馬來(lái)(lái)酰亞胺)環(huán)(huán)已烷-1-碳酸酯)(SMCC),Pierce 公司,產(chǎn)(chǎn)品目錄號 No.22360;N-乙基馬來(lái)(lái)酰胺(NEM),Sigma 公司,產(chǎn)(chǎn)品目錄號 E-1271;二甲基亞砜(DMSO),Aldrich 公司,產(chǎn)(chǎn)品目錄號 No. 27,685-5。
    試驗方法:
    1、藻紅蛋白溶液
    將藻紅蛋白沉淀復溶為溶液,用脫鹽柱或超濾管除鹽并將其緩沖液置換為20mM 磷酸鹽緩沖液,調整藻紅蛋白的最終濃度為5-10毫克/毫升。
    2、藻紅蛋白的衍生化
    將琥珀酰亞胺-4-(N-甲基馬來(lái)(lái)酰亞胺)環(huán)(huán)已烷-1-碳酸酯)(SMCC)溶解于無(wú)(wú)水二甲基亞砜(DMSO)配制成 10毫克/毫升的母液,每毫克的藻紅蛋白添加 11 微升的琥珀酰亞胺-4-(N-甲基馬來(lái)(lái)酰亞胺)環(huán)(huán)已烷-1-碳酸酯)
    (SMCC),鋁箔封好后于室溫旋轉反應 60 分鐘,使藻紅蛋白分子上的氨基與琥珀酰胺反應生成衍生化的藻紅蛋白。交換緩沖液預先平衡凝膠層析柱,將衍生化的藻紅蛋白過(guò)(guò)柱,收集藻紅蛋白峰。
    3、抗體的處理
    二硫蘇糖醇(DTT)溶解于蒸餾水中,配制成 1 摩爾/升的二硫蘇糖醇(DTT)母液,調整抗體的濃度,使其濃度至少為 4 毫克/毫升。
    每毫升抗體溶液中加入 20 微升的二硫蘇糖醇(DTT)母液,室溫靜置反應 40 分鐘,將抗體的二硫鍵打開(kāi)(kāi)形成巰基。交換緩沖液預先平衡凝膠柱,將反應液過(guò)(guò)柱,收集抗體部分。
    4、藻紅蛋白和抗體的共價(jià)(jià)交聯(lián)(lián)
    每毫克抗體加入 3.2 毫克的琥珀酰亞胺-4-(N-甲基馬來(lái)(lái)酰亞胺)環(huán)(huán)已烷-1-碳酸酯)(SMCC)衍生化的藻紅蛋白,鋁箔封好后于室溫旋轉反應 60 分鐘,使藻紅蛋白分子上的馬來(lái)(lái)酰亞胺基和抗體上的巰基實(shí)(shí)現共價(jià)(jià)交聯(lián)(lián)。
    10 毫克的 N-乙基馬來(lái)(lái)酰胺(NEM)溶解于 1.0 毫升的無(wú)(wú)水二甲基亞砜(DMSO)中制成 N-乙基馬來(lái)(lái)酰胺(NEM)母液(現配現用)。每毫克抗體中加入 3.4 微升N-乙基馬來(lái)(lái)酰胺(NEM)母液,鋁箔封好后于室溫旋轉反應 60 分鐘, 反應后,使抗體上的巰基封閉。
    5、交聯(lián)(lián)物的存儲
    將交聯(lián)(lián)物于存儲緩沖液中透析后保存于2-8℃。
    注意事項
    為了您的安全和健康,請穿實(shí)(shí)驗服并戴一次性手套操作!
    本產(chǎn)(chǎn)品主要用于科研領(lǐng)(lǐng)域,不宜用于臨床診斷或其他用途。
    運輸及保存方法
    儲存條件:2-8°C 避光保存,勿冷凍。
    穩定性:在適宜條件下至少可以?xún)Υ?2個(gè)(gè)月。

     

     

     

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